Mikroskopische Methoden in der Mikrobiologie

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Mikroskopische Untersuchungsmethoden sind Möglichkeiten , um eine Vielzahl von Objekten mit dem Einsatz von Spezialgeräten zu erkunden. Es erlaubt uns, die Struktur von Stoffen und Organismen zu betrachten, deren Größe über die Grenzen der Auflösung des menschlichen Auges ist. Der Artikel gibt eine kurze Analyse der mikroskopischen Methoden.

Überblick

используют в своей практике разные специалисты. Moderne Methoden der mikroskopischen Untersuchung mit verschiedenen Experten in ihrer Praxis. Unter ihnen sind die Virologen, Zytologie, Hämatologie, Morphologie und andere. Die wichtigsten Methoden der mikroskopischen Untersuchung sind seit langem bekannt. Die erste ist eine leichte Art und Weise auf Gegenstände suchen. In den letzten Jahren aktiv in die Praxis eingeführt, und andere Technologien. . Somit ist die Popularität der erworbenen Phasenkontrast, lumineszente, Interferenz, Polarisation, Infrarot, Ultraviolett, stereoskopische Verfahren der Forschung. Alle von ihnen sind auf einer Vielzahl von Eigenschaften des Lichts basiert. . Darüber hinaus, weit Elektronenmikroskopie Methoden. Diese Verfahren erlauben die Anzeigeobjekte eine gerichtete Strömung von geladenen Teilchen verwendet. Es sollte beachtet werden, dass diese Untersuchungsmethoden nicht nur in der Biologie und der Medizin verwendet werden. в промышленности. Ganz beliebte Methode der mikroskopischen Untersuchung von Metallen und Legierungen in der Industrie. Dies ermöglicht die Untersuchung des Verhaltens der Verbindungen zu bewerten Technologien zu produzieren, die Wahrscheinlichkeit des Bruchs und erhöhte Festigkeit zu minimieren.

Licht Möglichkeiten: Eigenschaften

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Solche mikroskopischen Methoden für Mikroorganismen und anderen Einrichtungen auf der Grundlage unterschiedlicher Studium Auflösung Ausrüstung. Ein wichtiger Faktor hierbei ist die Richtung der Strahleigenschaften des Objekts selbst. Letztere, insbesondere kann transparent oder opak sein. In Übereinstimmung mit den Eigenschaften des Objekts, um die physikalischen Eigenschaften des Lichtflusses zu ändern – die Helligkeit und Farbe aufgrund der Amplitude und die Wellenlänge, das Flugzeug, die Phase und die Richtung der Wellenausbreitung. . Über die Verwendung dieser Eigenschaften und verschiedene mikroskopische Methoden bauen.

Spezifität

Um die Möglichkeiten der Lichtobjekte zu untersuchen, in der Regel gefärbt. Dies macht es möglich, diese oder andere Eigenschaften zu identifizieren und zu beschreiben. Es ist notwendig, dass das Gewebe fixiert wurde, da die Färbung bestimmte Strukturen ausschließlich in Zellen getötet offenbart. Zellen trennen, um einen Farbstoff in Form von Vakuolen im Zytoplasma in lebend. Sie malt nicht über die Struktur. Aber mit den Live-Objekten und kann mit einem Lichtmikroskop untersucht werden. Zu diesem Zweck wichtige Möglichkeit des Lernens. In solchen Fällen kann ein Dunkelfeldkondensor. Es wird in dem Lichtmikroskop eingebettet.

Studieren unlackiert Objekte

Es wird durch Phasenkontrastmikroskopie durchgeführt. Dieses Verfahren beruht auf der Beugung des Strahls in Übereinstimmung mit den Eigenschaften des Objekts basieren. Während der Belichtung deutliche Veränderung der Phase und Wellenlänge. In der Mikroskoplinse vorhanden ist transluzenten Platte. Lebt oder festen, aber nicht lackierte Gegenstände aufgrund seiner Transparenz, fast keine Farbe ändern, und die Amplitude des Strahls der durch sie, provoziert nur eine Verschiebung der Wellenphase. Aber in diesem Fall, nachdem sie durch das Objekt übergeben, der Lichtfluss von der Platte abgelenkt. Als Ergebnis zwischen den Strahlen, die durch das Objekt fehlt, und in einen hellen Hintergrund eintritt, tritt die Wellenlängendifferenz. An einem bestimmten Wert seines visuellen Effekts auftritt – das dunkele Objekt auf einem hellen Hintergrund deutlich sichtbar sein wird, oder umgekehrt (in Übereinstimmung mit den Merkmalen einer Phasenplatte). Zu erhalten, sollte diese Differenz mindestens 1/4 Wellenlänge sein.

Anoptralny Verfahren

Er ist eine Art von Phasenkontrastmethode. Anoptralny Verfahren beinhalten die Verwendung einer Linse mit Spezialplatten, die nur die Farbe und die Helligkeit des Umgebungslichtes verändern. Dies erweitert erheblich die Möglichkeiten der ungefärbten lebenden Objekten zu studieren. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Applied Phasenkontrastmikroskop Methode Forschung in der Mikrobiologie, Parasitologie in der Studie von pflanzlichen und tierischen Zellen, Protozoen. In der Hämatologie Methode wird verwendet, um die Differenzierung von Blutzellen und Knochenmark zu berechnen und zu bestimmen.

Interferenztechniken

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Diese mikroskopisch kleinen Forschungsmethoden im Allgemeinen die gleichen Probleme wie Phasenkontrast lösen. Doch im letzteren Fall Experten können nur die Konturen von Objekten beobachten. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Die Interferenz mikroskopische Untersuchungsmethoden ermöglichen es uns , ihren Teil zu studieren, führen ein quantitativen Bewertungselemente. Dies ist möglich aufgrund der Aufspaltung des Lichtstrahls. Ein Strom geht durch das Partikel-Objekt, und die andere – durch. Im Okular des Mikroskops sie sich treffen und stören. Die sich ergebende Phasendifferenz Gewichts verschiedenen Zellstrukturen bestimmt werden. Wenn sequenzielle Messung mit dem vorgegebenen Brechungsindex kann dicke unfixierten Gewebe und lebendes Objekt, um den Proteingehalt darin festgelegt werden, um die Konzentration von Feststoffen und Wasser, und so weiter. In Übereinstimmung mit den Spezialisten erhaltenen Daten sind in der Lage, indirekt Membranpermeabilität, Enzymaktivität, Zellstoffwechsel zu bewerten.

Polarisation

Es wird mit Hilfe von Nicol-Prismen oder filmy Polaroids durchgeführt. Sie sind zwischen der Probe und der Lichtquelle angeordnet. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polarisationsmikroskopie Methode der Forschung in der Mikrobiologie ermöglicht es uns , Objekte mit inhomogenen Eigenschaften zu untersuchen. In isotropen Strukturen die Ausbreitungsgeschwindigkeit des Lichts unabhängig von der ausgewählten Ebene. In der anisotropen Systemen Rate variiert entsprechend das Licht entlang der Quer- bzw. Längsachse des Objekts ausgerichtet ist. Wenn der Brechungsindex-Wert entlang der Struktur größer ist als entlang der Quer, schafft eine positive Doppelbrechung. Dies ist typisch für viele biologische Objekte, die eine strenge molekulare Orientierung gefunden haben. Sie alle sind anisotrop. In dieser Kategorie insbesondere die Myofibrillen, Neurofibrillen, Cilien im Flimmerepithel, Kollagenfasern und andere.

Polarisationswert

Ein Vergleich der Art der Strahlung und die Anisotropie des Brechungsindex des Objekts ermöglicht es, die Molekülstruktur der Organisation zu bestimmen. Polarisationsverfahren dienen als eine der histologischen Analyseverfahren in der Zytologie verwendet und so weiter. Nicht nur gemalt Objekte können im Licht untersucht werden. Polarisationsverfahren machen es möglich, ungefärbt und nicht fixiert zu untersuchen – Mutter – Zubereitungen von Gewebeschnitten.

Fluoreszenztechniken

Sie basieren auf den Eigenschaften von bestimmten Objekten geben Glühen im blauvioletten Teil des Spektrums oder UV-Strahlen. Viele Substanzen wie Proteine, einige Vitamine, Coenzyme, Drogen, ausgestattet mit einem primären (en) Lumineszenz. Weitere Aufgaben beginnen durch Hinzufügen eines Fluorochroms zu glühen – spezielle Farbstoffe. Diese Additive sind selektiv diffuse oder verteilt in einzelne Zellstrukturen oder chemische Verbindungen. Diese Eigenschaft war die Grundlage für die Verwendung von Fluoreszenzmikroskopie mit histochemischen und zytologischen Untersuchungen.

Einsatzbereiche

Mit Immun-Fluoreszenz-Experten erkennen virale Antigene und deren Konzentration eingestellt werden Viren Antikörper und Antigene, Hormone, verschiedene Stoffwechselprodukte und so weiter identifiziert. In dieser Hinsicht ist die Diagnose von Herpes, Mumps, Hepatitis B, Influenza und anderen Infektionen unter Verwendung von fluoreszierenden Methoden der Materialforschung. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Mikroskopische Immuno-Fluoreszenz – Methode detektiert Tumormalignität, ischämischen Bereiche des Herzens in den frühen Stadien eines Herzinfarktes bestimmen und so weiter.

Die Verwendung von ultravioletten

Es wird Zellen oder Mikroorganismen, die auf der Fähigkeit einer Reihe von Substanzen in lebende basierend festgelegt sind, aber ungefärbt transparent unter sichtbarem Licht Stoffe UV-Strahlen mit einer spezifischen Wellenlänge absorbiert. Dies gilt insbesondere für hochmolekulare Verbindungen. Diese schließen Proteine, aromatische Säuren (Methylalanin, Tryptophan, Tyrosin, etc.), Nukleinsäuren und Purinbasen piramidinovye und so weiter. UV-Mikroskopie ermöglicht die Lage und Anzahl dieser Verbindungen zu spezifizieren. In der Studie von Lebewesen können Fachleute die Veränderungen in ihren metabolischen Prozessen beobachten.

zusätzlich

Infrarotmikroskopie wird in der Studie verwendet werden, lichtundurchlässig und ultraviolette Strahlen, die durch die Absorption der Objekte Strömungsstrukturen, deren Wellenlänge 750-1200 nm. diese Methode anzuwenden, besteht keine Notwendigkeit, um die Medikamente chemische Behandlung vorge aussetzen. Typischerweise wird die IR-Methode in der Anthropologie, Zoologie und andere Wissenschaften Industrie. Wie für die Medizin wird dieses Verfahren hauptsächlich in der Ophthalmologie und Neuromorphologie verwendet. Die Studie dreidimensionale Objekte durch ein stereoskopisches Mikroskop. Hardware-Design ermöglicht die linke und rechte Auge in einem anderen Winkel zur Überwachung. Opake Objekte werden bei relativ geringer Vergrßerung (120-mal höchstens) untersucht. Stereoskopische Verfahren sind in der Mikrochirurgie, Pathomorphologie in der Gerichtsmedizin verwendet.

Elektronenmikroskopie

Es wird verwendet, um die Struktur von Zellen und Geweben in der Makromolekül- und subzellulären Niveau zu untersuchen. Die Elektronenmikroskopie erlaubt uns einen qualitativen Sprung im Bereich der Forschung zu machen. Diese Methode wird in der Biochemie, Onkologie, Virologie, Morphologie, Immunologie, Genetik und anderen Bereichen. Signifikante Verbesserung der durch die Anlagenkapazität Fluss von Elektronen vorgesehen Auflösung, die durch das Vakuum elektromagnetische Feld übergeben. Letztere wiederum schaffen Speziallinsen. Elektronen können durch die Struktur des Objektes passieren oder von ihnen reflektiert wird mit Abweichungen von verschiedenen Winkeln. Das Ergebnis wird auf dem Leuchtschirm der Vorrichtung angezeigt. Wenn Transmissionsmikroskopie erhalten planare Ansicht beim Scannen bzw. umgeben.

Voraussetzungen

Es ist erwähnenswert, dass vor dem Pass elektronenmikroskopische Untersuchung, das Objekt eine besondere Ausbildung unterzogen wird. Insbesondere die Verwendung von physikalischer oder chemischer Fixierung von Geweben und Organismen. Schnittbiopsiematerial und zusätzlich, entwässert wird in Epoxidharz eingebettet, geschliffenes Glas oder Diamantmesser auf ultradünne Schnitte. Dann ihr Kontrast und zu studieren. Das Rastermikroskop untersucht die Oberfläche von Objekten. Dazu versprüht sie eine spezielle Substanz, die in der Vakuumkammer.