Ploskireva Medium (Bacto-Agar F): Beschreibung. medizinische Mikrobiologie

Ploskireva Medium ( im folgenden als noch Bacto Agar F bezeichnet) ist ein Nährmedium für die Kultivierung von bestimmten Mikroorganismen, vor allem Shigella und Salmonella. Als Quelle für ihre Verwendung infektiösen Material: Urin, Galle, Kot.

Geschichte

Nikolay Ivanovich Ploskirev – Soviet Mikrobiologe und Verdienter Arzt. Er wurde im Jahre 1869 und starb im Jahr 1948 geboren, den größten Teil seines Lebens in seiner Heimatstadt gearbeitet – Tomsk.

Im Jahr 1888, er, die Zukunft Wissenschaftler, ohne die sechste Klasse der Schule abgeschlossen, trat in die Armee. er war in der Lage, die Ausbildung nur im Jahr 1892 abgeschlossen ist, dann bestand die Prüfungen für die Zulassung zum Reich Tomsk Universität studierte er an der Fakultät für Medizin. Im Jahr 1898 erhielt er den Titel eines Doktors.

Ploskirev nahm in der russisch-japanischen Krieg, und nachdem er arbeitete im Krankenhaus Tomsk. Im Jahr 1910 wurde er an die Stelle des Leiters des dermatologischen und Geschlecht Krankenhauses Tomsk ernannt, und seit dreißig Jahren sein ständiger Kopf gewesen. Der gleiche Wissenschaftler war einer der Gründer der STI Klinik in Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev schrieb eine Reihe von Arbeiten zur Bekämpfung der Geschlechtskrankheiten gewidmet.

Struktur

Mittwoch Ploskireva – Material für den Anbau von Darmbakterien und müssen daher mehrere Arten von Nährstoffen enthalten. Es wird in trockenen Form hergestellt wird.

Ein ziemlich großer Anteil des Gesamtgewichts pankreatischen Hydrolysat sprat (10,4 g / l). Etwas weniger für hydrocitrate dibasisches Natrium (8,5 g / l) bilanziert. Auch gibt es einen trockenen Nährbrühe und Milchzucker (8,62 und 7,3 g / l).

Das zweite Titel Ploskireva Medium – J. Bacto-Agar in der Zusammensetzung ist es in einer Menge von Agar, 6,94 g / l. wasserfreiem Natriumgehalt gleich 5,1 g / l Seriovatistokislogo. Es ist die Anwesenheit von wasserfreiem Dinatriumphosphat – 2,1 g / l, Natriumsalze von Cholsäure etwa 3,46 g / l und Sodaasche – 2,4 g

Weniger als ein Gramm darin enthaltenen Indikatoren – Neutralrot (0,05) und Brillantgrün (0,0002). Der Jodgehalt – 0.13.

Anwendung

Die Untersuchung der biochemischen Prozesse von Bakterien spielt eine sehr wichtige Rolle bei der Diagnose von Krankheiten, die anaeroben Organismen führen. Arten in dieser Familie – Hunderte. Sie sind fast identisch in der Morphologie und kulturellen Eigenschaften und zuverlässigste Weg, um sie voneinander zu unterscheiden – ist das Studium der Biochemie.

Die Studie beginnt mit der Impfung von pathologischem Material in das Kulturmedium. Sie pathologisches Differential für coliforme Bakterien und ein Teil davon, zusätzlich zu Klar Agar, beinhaltet Licht und Lactose. Verarbeitungsfähigkeit von Lactose – ein wichtiges Zeichen der Differenzierung von Enterobakterien. Wenn dies entdeckt wird, verschiebt sich der pH-Wert in Richtung Säure und der Indikator aktiviert, die die Kolonie verwandelt.

Andere Länder können andere Nährmedien verwenden, aber ihr Wirkungsmechanismus entspricht die drei häufigsten in Russland – diese Umgebung Endo und Levine Ploskireva Umgebung.

Beschreibung des Verfahrens

Im Ausland Ploskireva analoges Medium ist ein so genannter MacConkey-Agar. In fertiger Form transparenter Lösung hat eine hellrosa-gelbe Farbe. Kolonien können Laktose verarbeiten, unter Ploskireva geben rot (Cranberry) Farbe. Wenn die Bakterien kann es nicht verarbeiten oder Kolonie ist farblos oder nur eine schwache Farbe.

Da die Zusammensetzung des Mediums enthält Substanzen Ploskireva Inhibitoren (Brillantgrün, Gallensalze, Jod), ist es fast vollständig hemmt das Wachstum von grampositiven Flora, wie in dem ersten Tag eshehiry signifikant das Wachstum verlangsamt, sowie andere übliche Begleitflora.

zweiter Schenkel

Von Interesse ist ferner die Auswahl der Kolonie, und es wird auf einem primären Speichermedium und Differenzierung ausgesät. Umgebung, in der es sät sollten mehrere Substrate enthalten. Bakterienkultur sollte in den Rohren angeordnet mit Bezug auf diese, auf das gleiche Medium enzymatische Aktivität erfassen, so dass es zwei Seiten:

• ein, in dem die schräg verlaufende Agar;
• mit einer Spalte.

Das Interesse der Forscher in der Kolonie bevölkert abgeschrägten Abschnitt dichten Takt und in einer Spalte – ein Stich. Zu diesem Zeitpunkt verwendet das Medium Russell, Kligler oder Olkenitskogo. Als Differentialdiagnose verwendet und Ploskireva Mittwoch.

Mikrobiologie und pathogenen Organismen

Agar Ploskireva ist ein wichtiger Faktor bei Infektionen durch Enterobacteriaceae zu erkennen. So zum Beispiel ist es gewachsen und Kolonien von Mikroorganismen unterscheiden, die Dysenterie verursachen. Diese anaerobe Organismen der Gattung schigella.

Wie jeder, der Teil einer Familie von Darmbakterien ist, haben Shigellen die Form von Stäben, die Größe von zwei Mikrometern. Sie stellen keine Kapseln und Sporen haben Geißeln – sie ermöglicht es ihnen, von Salmonellen zu unterscheiden, die wiederum beweglich sind. Sie wachsen gut auf den meisten einfachen Medien, bei einer Temperatur etwas oberhalb der Umgebungs (35-37 ° C) und 7,4 pH-Wert. Durch die Art des Wachstums, unterscheiden sich nicht Kolonien von Salmonellen.

Wie oben erläutert, können Mikroorganismen im Wesentlichen morphologische Unterschiede, aber in der biochemischen Prozesse des Lebens erheblich variieren. Somit, mit Ausnahme von Shigella Nyukestl, ohne die Bildung von Säuregas tritt während der Fermentation von Kohlenhydraten. Mit Ausnahme von Shigella sonnei, können sie nicht Laktose fermentieren, wird aber Glukose verdaut. Nur um ihre wichtigsten Funktionen, können Sie sie tragen, was sie können niraty zu Nitrit zu reduzieren. Ihre Kolonien wurden mit Harnstoff verdauen, sowie im Kulturmedium ist keine Verflüssigung von Gelatine.

Sammlung und Aufbereitung von Saatgut

Um Agenten der Ruhr zu erkennen, sind erforderlich, mikrobiologische Tests befallen Umgebungen, dh Kot Patienten. Nach Erhalt des Materials, müssen Sie so schnell wie möglich die Aussaat zu tun. Wenn dies nicht möglich ist, muss die Quelle in einem Konservierungsmittel gestellt werden – Phosphatpuffergemisch oder Glycerin. Bei 4 ° C, können sie für mehr als einen Tag gelagert werden. Sammle das Material mittels eines Glasrohres rektale erfolgen muß, die in das Rektum eingeführt wird.

Bei Studien von eitrigem Schleim Materialstücken, ausgewählt in zwei bis drei Röhren isotonische Natriumchloridlösung gewaschen werden.

Anwendung von pathogenen Bakterien in der Umwelt Ploskireva aus Glasspatel. Sie müssen sich auf einen kleinen Teil seiner Agar reiben, dann den Spatel auf die Umwelt abreißen und das restliche Material wird in die ausgesäten Oberfläche gerieben. Wenn die Aussaat in ein paar Tassen getan wird, dann zu jedem von ihnen brauchen eine neue Charge zu pflanzen.

Wenn schleimig-eitrige Stücke dort auf einer speziellen Analyse nehmen, bedeutet es nicht, dass es keine Vorhandensein von Krankheitserregern ist. In einem solchen Fall ist es notwendig, Kot in 10 ml Natriumchlorid (Konzentration 0,85%) zu emulgieren und dann sät ein oder zwei Tropfen auf einem Medium Ploskireva. Nichtemulgierter Stuhl kann in selenitovy Brühe gesät werden. Er benutzte auch, wenn statt der Kot ist Erbrochenem oder Waschungen.

Mikrobiologische Diagnostik

In der ersten Stufe der mikrobiologischen Untersuchungen Aussaat von pathogenen Bakterien in zwei Tassen durchgeführt wird, dann zu beobachten, wie Shigella wachsen. Am Mittwoch produziert Ploskireva eine Ernte, und die zweite – auf die Umwelt oder Endo Levin.

Aufgrund der Tatsache, dass es Stämme von Shigellen sind resistent gegen Antibiotika, um das Medium mit Chloramphenicol ergänzt wurde. Dann kommt es innerhalb von wenigen Tagen Inkubation in einem Inkubator bei 37 ° C

Am zweiten Tag der gewachsenen Kolonien zu erkunden. Diejenigen, die nicht auf der differentialdiagnostischen Medium gezüchtet farblos, ist es notwendig, auszusondern Russells mittel oder kurz „bunte Reihe.“ Weitere Forschung ist durch den Algorithmus der Hauptkulturen auf sie durchgeführt wird. Kolonien von Shigella am Mittwoch Ploskireva wachsen in Form von transparenten, farblosen und kleinen Säulen. Sie sind von zwei Arten:

• mit gezackten Kanten abgeflacht;
• abgerundet, konvex, mit einem typischen nassen Glanz.

Drei oder vier Kolonien müssen für Mobilität mikroskopirovat und untersucht werden. Ist letzteres nicht zu sehen, zog sie am Mittwoch Olkenitskogo eine Reinkultur zu isolieren. In Abwesenheit von charakteristischen Kolonien Shigella oder wenn kein Wachstum überhaupt beobachtet wird, ist es notwendig, Endo-Agar oder Ploskireva produziert Aussaat von selenitovogo Brühe. Wenn die typischen Kolonien in ausreichender Anzahl vorhanden sind, legen Sie die geschätzte Agglutination. Eine Mischung aus sera sonnei und Flexner, tritt Reaktion auf das Glas.

weitere Forschung

Am dritten Tag gibt es Veränderungen, die in den Kolonien auf dem Medium Russells aufgetreten sind. Wenn es eine Kultur, die nicht die Laktose abbaut und Glucose vergärt eine Säure zu erzeugen, wird es getrennt und analysiert, verbringen Mikroskopie sowie Durchführung der Aussaat „bunte Reihe,“ aber dieses Mal erweitert. Einfach die Agglutinationsreaktion, um die serologische Identifizierung, um.

Am letzten Tag, kann es auf der Grundlage von Änderungen in der „bunten Zahl“ abgeschlossen wird, sowie ein Überblick über die Agglutinationsreaktion (wenn es Fermentation von Kohlenhydraten ist).

Lagerung und Zubereitung

Herstellung von Agar Ploskireva tritt wie folgt auf:

1. 55 g Trockensubstanz in einem Liter destilliertem Wasser gerührt.
2. Gekochte für zwei bis drei Minuten, bis der Agar noch nicht vollständig geschmolzen.
3. Gieße in Petrischalen (Sterilitäts optional) Schicht von 5-6 mm.
4. Die Platten werden offen gelassen, für eine halbe Stunde bei Raumtemperatur (18-25 °). Nach dieser Zeit ist das Medium ausreichend härten und zu trocknen.

Mittwoch Ploskireva lichtempfindlich und hygroskopisch. Das Pulver sollte in einer versiegelten Verpackung gelagert werden, die relative Luftfeuchtigkeit im Raum darf 60% nicht überschreiten. Die optimale Temperatur für die Lagerung von 2 ° C bis 25 ° C Lagerung müssen mit diesen Regeln, sonst möglich ungenaue Ergebnisse entsprechen.