Polymerase-Kettenreaktion und seine Art und Umfang der

Polymerase – Kettenreaktion (PCR) – Verfahren der Molekularbiologie, die in biologischen Material geringe Mengen nachzuweisen ermöglicht Desoxyribonukleinsäure (DNA), oder besser gesagt, einige seiner Fragmente und multiplizieren sie viele Male. Dann wurden sie visuell durch Gelelektrophorese identifiziert. Die Reaktion wurde 1983 von K. Mullis und enthalten in der Liste der herausragenden Entdeckungen der letzten Jahre entwickelt.

Was sind die Mechanismen PCR

Das gesamte Verfahren beruht auf der Fähigkeit von Nukleinsäuren selbst zu replizieren, dass in diesem Fall künstlich im Labor statt. DNA-Replikation jede Region des Moleküls nicht beginnen kann, aber nur in Bereichen mit einer spezifischen Sequenz von Nukleotiden, – das Ausgangsfragment. Um für die Polymerase-Kettenreaktion begonnen hat, müssen wir Primer (oder DNA-Sonden). Es handelt sich um kurze Fragmente von DNA-Sequenzen mit einer gegebenen Nucleotidsequenz. Sie sind komplementär (d.h. ihm entspricht), der Beginn der Proben-DNA Abschnitte.

Natürlich zu schaffen Primer müssen Wissenschaftler die Sequenz von Nukleotiden der Studie Nukleinsäure, die in dem Verfahren beteiligt ist. Diese DNA-Sonden sorgen für die Spezifität der Reaktion und seine Einweihung. Polymerase – Kettenreaktion wird nicht gehen, wenn die Probe nicht mindestens ein Molekül des gewünschten DNA findet. Im allgemeinen erfordert die Reaktion den obigen Primer, einen Satz von Nukleotiden, hitzebeständiger DNA-Polymerase. Letzteres ist ein Enzym, – katalytische Reaktionen der Synthese von neuen Nucleinsäuremoleküle auf Stichprobenbasis. Alle diese Substanzen, einschließlich biologischer Materie, die DNA zu identifizieren, erforderlich ist, werden in einem Reaktionsgemisch (Lösung) kombiniert. Es wird in einem speziellen Thermostaten, der seine sehr schnelle Erwärmung und Abkühlung innerhalb der vorgegebenen Zeit durchführt – Zyklus. Sie sind in der Regel 30-50.

Wie ist diese Reaktion

Das Wesentliche hiervon ist, dass während eines Zyklus werden die Primer, die Abschnitten der gewünschten DNA gebunden, wonach es geht durch das Enzym zu verdoppeln. Auf der Basis der erhaltenen DNA-Stränge in nachfolgenden Zyklen synthetisierten mehr und mehr Stücke von identischen Molekülen.

Polymerase-Kettenreaktion wird konsequent nach ihren Schritten zurückgewonnen. Es gekennzeichnet durch eine erste während jedes Zyklus der Erwärmung und Abkühlung des Produktmenge zu verdoppeln. Im zweiten Schritt der Reaktion auftritt Verzögerung, da das Enzym beschädigt und verliert an Aktivität. Zusätzlich erschöpfter Bestände von Nukleotiden und Primern. In der letzten Stufe – das Plateau – die Produkte sind nicht akkumulieren mehr als Reagenzien über.

Wo es wird verwendet ,

Zweifellos findet die breiteste Anwendung der Polymerase-Kettenreaktion in der Medizin und Wissenschaft. Es befindet sich in öffentlichen und privaten Biologie, Tiermedizin, Pharmazie und sogar Ökologie verwendet. Während letztere tun, Lebensmittelqualität und Umwelt Objekte zu überwachen. Aktiv-Polymerase-Kettenreaktion in der forensischen Praxis Vaterschaft zu bestätigen und die Identifizierung der Identität einer Person. In der Forensik, sowie in der Paläontologie, oft diese Methode ist der einzige Weg, weil es in der Regel für die Untersuchung von extrem geringen Mengen an DNA ist. Natürlich ist eine sehr weit verbreitete Methode in der Praxis der Medizin gefunden. Er brauchte sie in Bereichen wie Genetik, ansteckende und onkologische Erkrankungen.